產(chǎn)品名稱：致病性大腸桿菌PCR試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2794
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Human HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman F13B(Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit2-甲基-3-羥基-4-吡喃酮 細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒

Human Cytochrome b-245 Beta Polypeptide ELISA KitHuman F5(Coagulation Factor V/Plasma Factor V) ELISA Kit2-[2-(1-哌嗪基)乙氧基]乙醇載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

Human NADPH oxidase 5 ELISA KitHuman F7(Coagulation Factor VII) ELISA Kit2-[2-(1-哌嗪基)乙氧基]乙醇冰凍切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

Human TRXR3(Thioredoxin reductase 3) ELISA KitHuman F9(Coagulation Factor IX) ELISA KitN-甲基-L-脯氨酸石蠟切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) ELISA KitHuman FⅫa(Activated Coagulation Factor Ⅻ) ELISA KitN-甲基-L-脯氨酸 載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA KitHuman FABP7(Fatty Acid Binding Protein 7, Brain) ELISA KitN-甲基-L-脯氨酸 冰凍切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

Human NT-proCNP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) ELISA KitHuman FABP8(Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin) ELISA Kit4-羥基喹啉 石蠟切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) ELISA KitHuman FAIM3(Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit4-羥基喹啉 細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒
致病性大腸桿菌PCR試劑盒α乳清蛋白檢測試劑盒10mg51166-71-3Mouse lipoprotein α, Lp-α Elisa KitHPLC98%α乳清蛋白檢測試劑盒10mgVB1gCAS號：封板膜 透明封板膜（易揭白背板）（75μm）133-32-438821-53-396T親環(huán)素D(CYPD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%α乳清蛋白檢測試劑盒10mgVB2353-45-9高端化學(xué)試劑血管非炎性蛋白3(VNN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)250mgCAS號：封板膜 微透氣封板膜（120μm）133-32-461336-70-796T纖溶酶(Fbn)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GC98%α葡萄糖苷酶檢測試劑盒20mgSEB2353-45-9高端化學(xué)試劑胰島素受體底物2(IRS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α葡萄糖苷酶檢測試劑盒20mg67233-85-6Mouse lipoprotein α, Lp-α Elisa KitGC98%α葡萄糖苷酶檢測試劑盒20mgSEB250mgCAS號：封板膜 微透氣封板膜（120μm）133-32-461336-70-796T纖溶酶(Fbn)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GC98%α葡萄糖苷酶檢測試劑盒20mgSEB2353-45-9高端化學(xué)試劑胰島素受體底物2(IRS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)125mgCAS號：孵育盒 單格（WB專用，透明）133-32-4317-34-096T血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%α平滑肌肌動蛋白檢測試劑盒20mgSEC2353-45-9高端化學(xué)試劑無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α平滑肌肌動蛋白檢測試劑盒20mg67233-85-6Mouse Big Endothelin, Big ET Elisa KitHPLC98%α平滑肌肌動蛋白檢測試劑盒20mgSEC125mgCAS號：孵育盒 單格（WB專用，透明）133-32-4317-34-096T血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%α平滑肌肌動蛋白檢測試劑盒20mgSEC2353-45-9高端化學(xué)試劑無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)200mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒  單格透明 大60096-23-35328-37-096T殺傷細(xì)胞凝集素樣受體亞家族A成員1(KLRA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)UV98%，鑒別α-內(nèi)嗎啡肽檢測試劑盒20mgSEE76-60-8高端化學(xué)試劑分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α-內(nèi)嗎啡肽檢測試劑盒20mg497-76-7Mouse Big Endothelin, Big ET Elisa KitUV98%，鑒別α-內(nèi)嗎啡肽檢測試劑盒20mgSEE200mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒  單格透明 大60096-23-35328-37-096T殺傷細(xì)胞凝集素樣受體亞家族A成員1(KLRA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)UV98%，鑒別α-內(nèi)嗎啡肽檢測試劑盒20mgSEE76-60-8高端化學(xué)試劑分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)200mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒 單格透明中60096-23-3501-30-496T白三烯E4(LTE4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%α肌動蛋白檢測試劑盒100mgPGH276-60-8高端化學(xué)試劑胃泌素釋放肽(GRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α肌動蛋白檢測試劑盒100mg497-76-7Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen, FⅧ-Ag Elisa KitHPLC98%α肌動蛋白檢測試劑盒100mgPGH2200mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒 單格透明中60096-23-3501-30-496T白三烯E4(LTE4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%α肌動蛋白檢測試劑盒100mgPGH276-60-8高端化學(xué)試劑胃泌素釋放肽(GRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)15mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒 單格透明小60096-23-3 56392-17-796T前列腺素F2α(PGF2α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GC98%α-黑色素細(xì)胞刺激素檢測試劑盒250mgSOD76-60-8高端化學(xué)試劑羥烷基輔酶A脫氫酶β(HADHβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α-黑色素細(xì)胞刺激素檢測試劑盒250mg497-76-7Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen, FⅧ-Ag Elisa KitGC98%α-黑色素細(xì)胞刺激素檢測試劑盒250mgSOD15mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒 單格透明小60096-23-3 56392-17-796T前列腺素F2α(PGF2α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GC98%α-黑色素細(xì)胞刺激素檢測試劑盒250mgSOD76-60-8高端化學(xué)試劑羥烷基輔酶A脫氫酶β(HADHβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)25mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒 單格透明全套86-87-379-14-196T白介素7(IL7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GC98%α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒20mgDHPR76-60-8高端化學(xué)試劑碳酸酐酶Ⅻ(CA12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒20mgMouse Fcoagulation factor Ⅸ, FⅨ Elisa KitGC98%α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒20mgDHPR25mgCAS號：WB孵育盒 抗體孵育盒 單格透明全套86-87-379-14-196T白介素7(IL7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)GC98%α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒20mgDHPR76-60-8高端化學(xué)試劑碳酸酐酶Ⅻ(CA12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)50mgCAS號：蓋玻片 12*12mm86-87-366778-17-496TToll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98.0%(T)α干擾素檢測試劑盒20mgCD7362625-32-5高端化學(xué)試劑細(xì)胞色素P450家族成員11A1(CYP11A1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α干擾素檢測試劑盒20mg2592-95-2Mouse Fcoagulation factor Ⅸ, FⅨ Elisa Kit98.0%(T)α干擾素檢測試劑盒20mgCD7350mgCAS號：蓋玻片 12*12mm86-87-366778-17-496TToll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98.0%(T)α干擾素檢測試劑盒20mgCD7362625-32-5高端化學(xué)試劑細(xì)胞色素P450家族成員11A1(CYP11A1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)100mgCAS號：蓋玻片 18*18mm86-87-354-85-396TToll樣受體6(TLR6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC97%α-輔肌動蛋白4檢測試劑盒20mgDHCR762625-32-5高端化學(xué)試劑周期素依賴性激酶6(CDK6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α-輔肌動蛋白4檢測試劑盒20mg2592-95-2Mouse coagulation factor Ⅹ, FⅩ Elisa KitHPLC97%α-輔肌動蛋白4檢測試劑盒20mgDHCR7100mgCAS號：蓋玻片 18*18mm86-87-354-85-396TToll樣受體6(TLR6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC97%α-輔肌動蛋白4檢測試劑盒20mgDHCR762625-32-5高端化學(xué)試劑周期素依賴性激酶6(CDK6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)20mgCAS號：蓋玻片 20*20mm   50片15165-79-4 60719-84-896T髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%α-輔肌動蛋白3檢測試劑盒20mgMFO224967-52-6高端化學(xué)試劑腫瘤易感基因101(TSG101)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

α-輔肌動蛋白3檢測試劑盒20mg2320-96-9Mouse coagulation factor Ⅹ, FⅩ Elisa KitHPLC98%α-輔肌動蛋白3檢測試劑盒20mgMFO20mgCAS號：蓋玻片 20*20mm   50片15165-79-4 60719-84-896T髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)HPLC98%α-輔肌動蛋白3檢測試劑盒20mgMFO224967-52-6高端化學(xué)試劑腫瘤易感基因101(TSG101)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)250mgCAS號：蓋玻片 24*24mm    100片15165-79-471751-41-296T多巴胺受體D5(DRD5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%（T）α-輔肌動蛋白1檢測試劑盒100mgECMA-Ab 7114-03-6高端化學(xué)試劑A類清道夫受體3(SCARA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)