抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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DIRAS2蛋白抗體
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英文名稱
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Anti-DIRAS2
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DIRAS2
中文名稱 DIRAS2蛋白抗體
別 名 Di Ras2; DIRAS family, GTP binding RAS like 2; Distinct subgroup of the Ras family member 2; DIRA2_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DIRAS2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是DIRAS2蛋白抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
碳頭孢L異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Loracarbef LIsomer CAS:
碳頭孢標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Loracarbef CAS:121961226
洛匹那韋標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Lopinavir CAS:192725170
洛哌丁標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Loperamide Hydrochloride CAS:34552835
L甲氨標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:LMethionine CAS:63683
L賴氨標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:LLysine Hydrochloride CAS:657272
L賴氨醋標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:LLysine Acetate CAS:57282492
L亮氨標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:LLeucine CAS:61905
碳標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Lithium Carbonate CAS:554132
L異亮氨標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:LIsoleucine CAS:73325
賴諾普利標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Lisinopril CAS:83915837
噻羅寧標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Liothyronine CAS:1823692
亞油酯酰聚氧甘油酯標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Linoleoyl Polyoxylglycerides CAS:
標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Lindane CAS:58899
林可霉素標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱:Lincomycin Hydrochloride CAS:7179499
直接剛果紅 特價(jià)促銷 英文名稱:Congored 含量:超純,99%
直接黑EX 特價(jià)促銷 英文名稱:DirectBlack38 含量:生物技術(shù)級,98%
植物細(xì)胞分裂素 特價(jià)促銷 英文名稱:Zeatin 含量:USP級,98.5%
植物血凝素 特價(jià)促銷 英文名稱:PHA 含量:BR,0.53u/mg,馬鈴薯,粉末
植物血球凝集素PHAP 特價(jià)促銷 英文名稱:PHAP 含量:BR,10u/mg,甘薯,液體
制真 特價(jià)促銷 英文名稱:Nystatin 含量:BR,魚鱗提取
質(zhì)譜級銀染試劑 特價(jià)促銷 英文名稱:Masssilverstain 含量:生物技術(shù)級,98%
中分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白 特價(jià)促銷 英文名稱:MiddlerangeproteinMWmarker 含量:BR,100u/mg
中溫淀粉酶 特價(jià)促銷 英文名稱:糊精酶 含量:BR,4000u/g
中性樹膠 特價(jià)促銷 英文名稱:Neutralbalsam 含量:BR,99.5%
5-Fluoro-2-hydroxypyridine,97%通用試劑 5G
2-Chloro-5-fluoropyridine,95%通用試劑 1G
2-Chloro-3-fluoropyridine,97%通用試劑 5G
3-Bromo-5-fluoropyridine,97%通用試劑 1G
4-Bromo-2-chloropyridine,97%通用試劑 1G
3-Bromo-2-chloropyridine,98%通用試劑 1G
2-Bromo-5-chloropyridine,98%通用試劑 1G
5-Bromo-2-chloro-3-picoline,98%通用試劑 1G
3-Amino-2-methoxypyridine,98%通用試劑 1G
2-Amino-3-bromo-5-chloropyridine,97%通用試劑 1G
3-Amino-5-bromo-2-chloropyridine,97%通用試劑 1G
5-Bromo-2-chloro-3-nitropyridine,97%通用試劑 1G
(R)-5-(Bromomethyl)-2-pyrrolidinone,96%通用試劑 1G
3-Methoxy-2-nitropyridine,98%通用試劑 25G
2,3-Cyclopentenopyridine,98%通用試劑 5G
DIRAS2蛋白抗體 Streptomyces│fradiae種屬:Streptomyces│fradiae
分離基物:土壤表層5-10cm處
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生新霉素和弗氏菌素
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:12
生長條件:28-30℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法弗氏鏈霉菌