抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-ATG9A
中文名稱 自噬相關(guān)蛋白9A抗體
別 名 APG9 like 1; APG9-like 1; APG9L1; ATG9; ATG9 autophagy related 9 homolog A; ATG9A; Autophagy related protein 9A; Autophagy-related protein 9A; mATG9; ATG9A_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學 細胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 94kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATG9A
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是自噬相關(guān)蛋白9A抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
環(huán)孢素 A 22Tricosenoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)X射線修復交叉互補蛋白4一抗
山柰O葡萄糖苷 10Undecynoic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)X射線修復交叉互補蛋白3一抗
胡椒 10Undecynol 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)DNA損傷修復酶ERCC3蛋白一抗
巴比妥 Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers) 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(T)黃嘌呤氧化酶一抗
葫蘆素B 2Amino',5dichlorobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)DNA補充修復XPC細胞蛋白一抗
NaDL精... 4Allyloxyhydroxybenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)腫瘤/睪丸抗原12家族2一抗
2,2'聯(lián) 3,3',4,4'Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(T)型肝炎X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4一抗
鈣黃綠素 4Benzoyl 4'Methyldiphenyl Sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1一抗
漢黃芩素 4,4'Bis(methylamino)benzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)X連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白一抗
十水亞鐵氰化鈉 2,4'Dichlorobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)膜轉(zhuǎn)運蛋白XK一抗
十一基鈉 2,2'Dihydroxy,4'dimethoxybenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)X射線修復交叉互補蛋白一抗
十四基鈉 4,4'Dihydroxybenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白一抗
十三基鈉 2,2'Dihydroxymethoxybenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)細胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白一抗
十八基鈉 4,4'Dimethoxybenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)XAB2蛋白一抗
肌苷一二鈉鹽 2,2'Dihydroxybenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)型肝炎X蛋白HBX一抗(N端)
十六基鈉 4,4'Diaminobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)型肝炎X蛋白HBX一抗
脲 4,4'Dichlorobenzophenone 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)軟骨細胞蛋白39一抗
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體Barbacarpan中文名:別名:分子式:C20H18O4
抗菌肽/天蠶素抗體Cannabispirol中文名:別名:β-Cannabispiranol分子式:C15H20O3
高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體Pyrocatechol monoglucoside中文名:別名:分子式:C12H16O7
多瘤病毒增強了結(jié)合蛋白2β抗體Hydroxytuberosone中文名:別名:分子式:C20H18O6
信號轉(zhuǎn)導蛋白亞基7A抗體α-Cannabispiranol中文名:別名:分子式:C15H20O3
自噬相關(guān)蛋白9A抗體 Kluyveromyces│lactis種屬:Kluyveromyces│lactis
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0181
生長條件:24℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法乳酸克魯維酵母