"CAL-148細(xì)胞：人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開(kāi)蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候，有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過(guò)的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作步驟和注意事項(xiàng)：１.打開(kāi)無(wú)菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈，消毒半小時(shí)以上。２.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過(guò)多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開(kāi)各類瓶蓋前先過(guò)火，以固定灰塵;打開(kāi)的瓶口、試管口過(guò)火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái)，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開(kāi)直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開(kāi)培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
Tu177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、HPDE細(xì)胞
Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞
hRPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞
RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
NCIH1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細(xì)胞、H498細(xì)胞、H-847細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
NCIH1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OP-9細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
NCI H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞
PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
P3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
P3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
LS 513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞
TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞
H-1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞
WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
UMRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞
NCI H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
RSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞
JAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA-1細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞
HS578細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞
HCV-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞
OACP4 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞
KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細(xì)胞、YH-13細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞
DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1184細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞
HB 611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞
H-196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC941122細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞
SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞
H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞
H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細(xì)胞、H841細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
NCI-SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
OVCAR.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-446細(xì)胞、HCM細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞
NCIH2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
JAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA-1細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、BHK細(xì)胞
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細(xì)胞、H64細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞
Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞、SGC996細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、HFL細(xì)胞
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