"T-47D細胞：人乳腺管癌細胞系
細胞背景資料：浸潤性導(dǎo)管癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
SW780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞
NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
UWB1.289細胞系相關(guān)產(chǎn)品：118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
NCIH820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
ARO-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
CHOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
Hs 934.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
GP2-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細胞、COLO320-DM細胞、NCI-H1944細胞
H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
SUM-190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞
G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
NIH:OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞
SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
CO115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
SuDHL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞
NCIH1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞
CAL 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
GM 637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞
P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
MonoMac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
HeLa S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
KP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
TMD-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞
Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV-29細胞、H841細胞、NIH:OVCAR-3細胞
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、WSU-DLCL2細胞、SNU-668細胞
H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-2664細胞、SW 837細胞、Caov-4細胞
Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細胞、451-LU細胞、HFL1細胞
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