"RF/6A細胞：猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞系
細胞背景資料：脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜；內(nèi)皮細胞；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
SCC 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
MDAMB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
EC109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
H-1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
Toledo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞
OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
LMTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC366細胞、CG4細胞、COLO-680N細胞
BV2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
HCC941122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞
GC1-SPG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
NTera 2/cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
SUM 149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
SKRC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
MLMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial細胞：-1細胞、HCC0070細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
BT-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma細胞：細胞、ROS17/2.8細胞
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
5-8F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞
SK Col 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HCC1954-BL細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HPAFII細胞、PLB-985細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細胞、A375.S2細胞、TE-3A細胞
NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12T細胞、SUD4細胞、TE-10細胞
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