"HuO9細胞：人骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
NCI-H2195細胞系相關產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
DHL-2細胞系相關產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
NK-92MI細胞系相關產(chǎn)品：SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
SK-MEL 28細胞系相關產(chǎn)品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
WEHI 3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
SPDC-CCL141細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
C1R細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
NuTu-19細胞系相關產(chǎn)品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
HRIF細胞系相關產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
2PK3細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
COLO680N細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
B/C3T3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
RH30SJ細胞系相關產(chǎn)品：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
UCLA SO M14細胞系相關產(chǎn)品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
SupT1細胞系相關產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
SupT1細胞系相關產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
NCIH1563細胞系相關產(chǎn)品：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
U-87 MG細胞系相關產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
HEK-293F細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
CA922細胞系相關產(chǎn)品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
IPLB-SF-21細胞系相關產(chǎn)品：Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
HLF細胞系相關產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
Tu212細胞系相關產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
RCK-8細胞系相關產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品：EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
HSMC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
LNCaP FGC細胞系相關產(chǎn)品：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
LA-N-6(OAN)細胞系相關產(chǎn)品：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
Hela-Ap-1細胞系相關產(chǎn)品：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
SNU-387細胞系相關產(chǎn)品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
Bac12F5細胞系相關產(chǎn)品：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
H6c7細胞系相關產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
MDAMB175VII細胞系相關產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
Mono-Mac-1細胞系相關產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
JS1細胞系相關產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
CL34細胞系相關產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關產(chǎn)品：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
HuH1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
HCC-1187細胞系相關產(chǎn)品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
MC3T3-E細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
NBL-S細胞系相關產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
LUDLU-1細胞系相關產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞
HeLa229細胞系相關產(chǎn)品：RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
OE-21細胞系相關產(chǎn)品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
CTLL-2細胞系相關產(chǎn)品：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
SKNFI細胞系相關產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
NCI-H196細胞系相關產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
MMAc.SF細胞系相關產(chǎn)品：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
TGW細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
TGW細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
Hs 611.T細胞系相關產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞
GM03573A細胞系相關產(chǎn)品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
DLM8細胞系相關產(chǎn)品：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品：He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
U87 MG細胞系相關產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
PANC3.27細胞系相關產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
Y1細胞系相關產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
HFL1細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
JROECL 19細胞系相關產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
Hs 729細胞系相關產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
Colon38細胞系相關產(chǎn)品：H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
LAN-6細胞系相關產(chǎn)品：H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞
TE3細胞系相關產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
SUP T1細胞系相關產(chǎn)品：BT-325細胞、LAPC4細胞、NCIH358細胞
KMS-26細胞系相關產(chǎn)品：ARH-77細胞、NCM460細胞、SW 1353細胞
NK-92MI細胞系相關產(chǎn)品：SLMT1細胞、CTV-1細胞、HEK-293H細胞
AG06814-N細胞系相關產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、HBZY-1細胞、BV173細胞
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