"NCI-H69細胞：人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：懸浮生長，聚團
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
【懸浮型細胞的傳代操作】１)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心１０００rpm ５分鐘；２)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)?！咀⒁馐马棥浚?嚴格的無菌操作；２)適度消化：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。附：EDTA(０.０２％四乙酸二鈉)消化液配方：EDTA ０.２０g，NaCl ８.００g，KCl ０.２０g，KH２PO４ ０.０２g，葡萄糖 ２.００g，０.５％紅４ml，加入蒸餾水定容至１０００ml。１０磅２０min高壓滅菌，使用時調(diào)節(jié)PH值到７.４。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要徹底清洗，否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁。
Wien133細胞系相關產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
SNU-739細胞系相關產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
293-GP細胞系相關產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
NCI-H157細胞系相關產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
CAL 78細胞系相關產(chǎn)品：SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
MC3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
SN4741細胞系相關產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關產(chǎn)品：H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
SCLC21H細胞系相關產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
LS-174細胞系相關產(chǎn)品：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
VMM5細胞系相關產(chǎn)品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
H1341細胞系相關產(chǎn)品：T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
PC3-M細胞系相關產(chǎn)品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
BEAS-2B細胞系相關產(chǎn)品：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
BEAS-2B細胞系相關產(chǎn)品：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
A875細胞系相關產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1838細胞、H157細胞、SK 1細胞
NCI-N87細胞系相關產(chǎn)品：NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關產(chǎn)品：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
MDA-453細胞系相關產(chǎn)品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
MGC-803細胞系相關產(chǎn)品：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
HuH 6細胞系相關產(chǎn)品：UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
Vx-2細胞系相關產(chǎn)品：HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
HeLa 229細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
LU165細胞系相關產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
A2780CP70細胞系相關產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
HCM細胞系相關產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
Colon 26細胞系相關產(chǎn)品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
GLC-15細胞系相關產(chǎn)品：LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
Ly7細胞系相關產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
HCT-8/V細胞系相關產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
PC14細胞系相關產(chǎn)品：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
OSK-1細胞系相關產(chǎn)品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
MMQ細胞系相關產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
293T/17細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
Hs600T細胞系相關產(chǎn)品：SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
RS1細胞系相關產(chǎn)品：HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
HCC78細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
CHL細胞系相關產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
Lieming Xu-2細胞系相關產(chǎn)品：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
Walker-256細胞系相關產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
ES2細胞系相關產(chǎn)品：OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
HBdSMC細胞系相關產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
NCI-H69細胞系相關產(chǎn)品：H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞
MDA2B細胞系相關產(chǎn)品：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
H2009細胞系相關產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
HGBEC細胞系相關產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
SP2細胞系相關產(chǎn)品：CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞
SG231細胞系相關產(chǎn)品：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
FCCH1018細胞系相關產(chǎn)品：VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
786-O細胞系相關產(chǎn)品：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
C33細胞系相關產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
MOLT 16細胞系相關產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
CNE-2Z細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
BHP10-3細胞系相關產(chǎn)品：A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
SACC-83細胞系相關產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
HEK293S細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞
H-820細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞
MDA-MB 453細胞系相關產(chǎn)品：LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
B16/BL6細胞系相關產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
3T3(A31)細胞系相關產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
MS-751細胞系相關產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
U138-MG細胞系相關產(chǎn)品：HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
A-172 MG細胞系相關產(chǎn)品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
H2085細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
Mia PACA 2細胞系相關產(chǎn)品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
JJN-3細胞系相關產(chǎn)品：HOC1細胞、CCC-HIE-2細胞、LAD2細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產(chǎn)品：HEH2細胞、QGP 1細胞、U251n細胞
293-GP細胞系相關產(chǎn)品：SHG 44細胞、Sc-1細胞、Onda 11細胞
OV2008細胞系相關產(chǎn)品：Co-115細胞、SUM190PT細胞、MDCK細胞
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