"SNU-387細胞：人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
H647細胞系相關產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
NCI H548細胞系相關產(chǎn)品：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
TOV-112細胞系相關產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
BRL 3A細胞系相關產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
H2347細胞系相關產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
HTori 3細胞系相關產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
PLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
Calu 3細胞系相關產(chǎn)品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
SN12PM6細胞系相關產(chǎn)品：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
Hs 675.T細胞系相關產(chǎn)品：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
RT-BM-1細胞系相關產(chǎn)品：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
HEK/EBNA細胞系相關產(chǎn)品：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
Nb2細胞系相關產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
SNU761細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
SNU449細胞系相關產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
SNU449細胞系相關產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
NCIH187細胞系相關產(chǎn)品：J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
Hs 888.Lu細胞系相關產(chǎn)品：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
KBM7細胞系相關產(chǎn)品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
MFD-1細胞系相關產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
RAT2細胞系相關產(chǎn)品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
SW-1116細胞系相關產(chǎn)品：CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
AR42J細胞系相關產(chǎn)品：COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
HEK-293FT細胞系相關產(chǎn)品：B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
MiaPaCa-2細胞系相關產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
HCC1806細胞系相關產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
SJSA細胞系相關產(chǎn)品：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
T1-73細胞系相關產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關產(chǎn)品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
NSC-34細胞系相關產(chǎn)品：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
BIC1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
Panc327細胞系相關產(chǎn)品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
T-HEECs細胞系相關產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
H1703細胞系相關產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
LA795細胞系相關產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
SKCO1細胞系相關產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
HGBEC細胞系相關產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
H650細胞系相關產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
SUDHL-4細胞系相關產(chǎn)品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關產(chǎn)品：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
QBI-293A細胞系相關產(chǎn)品：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
P3/ag細胞系相關產(chǎn)品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
Hi-five細胞系相關產(chǎn)品：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
Walker256細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
3 LL細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
HTSMC細胞系相關產(chǎn)品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
COLO 16細胞系相關產(chǎn)品：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
NCTC 3960細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
H-2198細胞系相關產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
C12細胞系相關產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
C12細胞系相關產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
CATH-a細胞系相關產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
C-Li-7細胞系相關產(chǎn)品：SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
LL2細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
RMG1細胞系相關產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
ACHN細胞系相關產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
R 2 C細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
MDA.MB.231細胞系相關產(chǎn)品：PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞
SKMEL28細胞系相關產(chǎn)品：Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
Calu 3細胞系相關產(chǎn)品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
R 2 C細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
GLC-82細胞系相關產(chǎn)品：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
293/EBNA-1細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
MONO-MAC 6細胞系相關產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
130 T細胞系相關產(chǎn)品：H2106細胞、D407細胞、Hs 578.Bst細胞
Kuramochi細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-4細胞、GM00215細胞、MiaPaCa2細胞
TOV-112細胞系相關產(chǎn)品：SW-626細胞、143B細胞、MyLa2059細胞
GM637A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、MLE12細胞、Hs1.Tes細胞
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