"HECV 人血管內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
HECV 人血管內(nèi)皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
HECV 人血管內(nèi)皮細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。２.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。３.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細胞，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。４.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài)，比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細胞，在其生長速度慢的時候，會好一點，比如剛剛復蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞 
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞 
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞 
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞 
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞 
OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞 
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞 
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞 
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞 
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞 
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞 
HT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞 
SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞 
Oregon J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞 
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞 
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞 
KOSC-2 cl3-43細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞 
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞 
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞 
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MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞 
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞 
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞 
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞 
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞 
H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞 
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞 
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞 
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞 
NCIH2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞 
SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞 
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞 
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞 
OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞 
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞 
MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞 
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞 
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞 
H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞 
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞 
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞 
MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞 
CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞 
SW 962細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞 
BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞 
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞 
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞 
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞 
HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞 
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞 
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞 
SaOS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞 
H-735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞 
Jurkat-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞 
NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞 
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞 
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞 
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞 
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞 
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞 
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞 
HECV 人血管內(nèi)皮細胞系
C518細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞 
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞 
RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞 
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞 
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞 
H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞 
32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞 
KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細胞、2008細胞、NKT細胞 
HAC-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞 
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細胞、ECC 12細胞、RBL 1細胞 
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細胞、H2195細胞、H-1404細胞 
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、CNE2細胞、T-CAM2細胞 
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