"OKa-C-1 人低分化肺癌鱗癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數量。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
OKa-C-1 人低分化肺癌鱗癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數生長期細胞，經胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
OKa-C-1 人低分化肺癌鱗癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
PC-3M IE8細胞系相關產品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞 
HEL-299細胞系相關產品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞 
Hca-F細胞系相關產品：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞 
SW-954細胞系相關產品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 
COLO320DM細胞系相關產品：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞 
MDCC MSB1細胞系相關產品：MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞 
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關產品：MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞 
LADMAC細胞系相關產品：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞 
UCLA-RO 81細胞系相關產品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞 
VK2/E6E7細胞系相關產品：ESC細胞、H660細胞、C17細胞 
CFPAC1細胞系相關產品：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞 
Molm 14細胞系相關產品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞 
TB1 Lu細胞系相關產品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞 
DR2R1610細胞系相關產品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞 
Anip973細胞系相關產品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞 
SW-954細胞系相關產品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 
SW620細胞系相關產品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞 
WI-38細胞系相關產品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞 
MRC 5細胞系相關產品：BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞 
SCC 4細胞系相關產品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞 
OKa-C-1 人低分化肺癌鱗癌細胞系
CTV-1細胞系相關產品：P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞 
Mono Mac 1細胞系相關產品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞 
Hepatoma-22細胞系相關產品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞 
NTERA2細胞系相關產品：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞 
NCI-H660細胞系相關產品：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞 
SUM-102PT細胞系相關產品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞 
Natural Killer-92細胞系相關產品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞 
CCC-HHM-2細胞系相關產品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞 
SNU119細胞系相關產品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞 
Colon38細胞系相關產品：H125細胞、RC13細胞、JF305細胞 
HUT 125細胞系相關產品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞 
RA.1細胞系相關產品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞 
KMS18細胞系相關產品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞 
A431/P細胞系相關產品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞 
H-1694細胞系相關產品：HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞 
WEHI 3細胞系相關產品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞 
32D clone3細胞系相關產品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞 
B-cell with DC Morphology細胞系相關產品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞 
Kelly細胞系相關產品：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞 
2V6.11細胞系相關產品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞 
NEC8細胞系相關產品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞 
CAL 85-1細胞系相關產品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞 
MDA-415細胞系相關產品：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 
HEC1-B細胞系相關產品：HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞 
MB231細胞系相關產品：MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞 
SKMEL2細胞系相關產品：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞 
SNU-354細胞系相關產品：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞 
RTE細胞系相關產品：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞 
NCI-H676細胞系相關產品：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞 
Mouse podocyte細胞系相關產品：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 
Hepa1-6細胞系相關產品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞 
CATHa細胞系相關產品：KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞 
PC3M細胞系相關產品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞 
SNU251細胞系相關產品：LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞 
MDCK (NBL-2)細胞系相關產品：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞 
EVSAT細胞系相關產品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞 
X63Ag8-653細胞系相關產品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞 
BHK21細胞系相關產品：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞 
KBM5細胞系相關產品：KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞 
P3JHR-1細胞系相關產品：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞 
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關產品：MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞 
OKa-C-1 人低分化肺癌鱗癌細胞系
Bac1 2F5細胞系相關產品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞 
KM-12細胞系相關產品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞 
WSUDLCL2細胞系相關產品：CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞 
H2330細胞系相關產品：MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞 
Capan1細胞系相關產品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞 
Emory University-2細胞系相關產品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞 
NCI-H209細胞系相關產品：RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞 
Chinese Hamster Ovary細胞系相關產品：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞 
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關產品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞 
B16-F10-BL6細胞系相關產品：OVCAR.4細胞、WB-F344細胞、ATC241細胞 
SK-ES1細胞系相關產品：HS-5細胞、GM2132細胞、SU-DHL-5細胞 
HCAEC細胞系相關產品：NCIH522細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、Wien133細胞 
"