"MM96L 人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；淋巴結轉移；女性 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
MM96L 人黑色素瘤細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
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因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
NCI-H125細胞系相關產品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞 
T98-G細胞系相關產品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞 
WEHI 164 TC細胞系相關產品：Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞 
SNU423細胞系相關產品：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞 
HMEC-1細胞系相關產品：LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞 
NRK-49F細胞系相關產品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞 
526mel細胞系相關產品：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞 
HLMVEC細胞系相關產品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞 
A-9細胞系相關產品：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞 
SKMEL2細胞系相關產品：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞 
SHI1細胞系相關產品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞 
MEC-1細胞系相關產品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞 
SN12C細胞系相關產品：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞 
SP2/0 Ag-14細胞系相關產品：Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞 
Fetal Human Colon細胞系相關產品：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞 
COV 504細胞系相關產品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞 
COV 504細胞系相關產品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞 
SW-756細胞系相關產品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞 
H-250細胞系相關產品：H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞 
Emory University-2細胞系相關產品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞 
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SKCO 1細胞系相關產品：TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞 
GM03571細胞系相關產品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞 
NCIH1385細胞系相關產品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 
VeroC1008細胞系相關產品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞 
CFPAC細胞系相關產品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞 
LIPF155C細胞系相關產品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞 
SNU-5細胞系相關產品：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞 
Granta519細胞系相關產品：TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞 
H-508細胞系相關產品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞 
HCC-9724細胞系相關產品：LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞 
Caki-1細胞系相關產品：NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞 
H460細胞系相關產品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞 
SNU-182細胞系相關產品：B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞 
A498細胞系相關產品：H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞 
H-1373細胞系相關產品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞 
293/EBNA細胞系相關產品：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞 
HCT-FET細胞系相關產品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞 
WB F344細胞系相關產品：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞 
NCIH1651細胞系相關產品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞 
Tu-686細胞系相關產品：HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞 
LLC-MK2細胞系相關產品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞 
H-508細胞系相關產品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞 
HEK 293細胞系相關產品：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞 
HPASMC細胞系相關產品：SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞 
MDA-MB-231-GFP細胞系相關產品：EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 
NCI-SNU-216細胞系相關產品：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞 
SUM 102細胞系相關產品：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞 
TR 146細胞系相關產品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞 
HSAS3細胞系相關產品：PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞 
Hs683T細胞系相關產品：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞 
RBL2H3細胞系相關產品：b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞 
MESSA-DX5細胞系相關產品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞 
COLO-320-DM細胞系相關產品：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞 
KMM1細胞系相關產品：RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞 
SNG-M細胞系相關產品：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞 
LC-1 sq細胞系相關產品：CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞 
MDA-MB-468-RED細胞系相關產品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞 
2780CP細胞系相關產品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞 
293c18細胞系相關產品：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關產品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞 
H1417細胞系相關產品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞 
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McArdle RH-7777細胞系相關產品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞 
IMR 32細胞系相關產品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞 
BT-20細胞系相關產品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞 
3T3細胞系相關產品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞 
NOZ細胞系相關產品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞 
Z-138細胞系相關產品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞 
MCF-7/ADR-RES細胞系相關產品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞 
U031細胞系相關產品：HEL299細胞、NCIH1385細胞、CCF-STTG1細胞 
LUDLU-1細胞系相關產品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞 
MCF-7B細胞系相關產品：Jurkat E6.1細胞、NCI522細胞、HEB細胞 
N1E115細胞系相關產品：ST-2細胞、SW 780細胞、NCI-H226細胞 
WEHI 164 TC細胞系相關產品：Hs683T細胞、A.704細胞、Colon38細胞 
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