"HK-2 [Human kidney] 人腎小管上皮細胞系
細胞背景資料：該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞，通過導入HPV-１６ E６/E７基因而獲得永生化。將含有HPV-１６ E６/E７基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN １６ E６/E７轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-２，Psi-２細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA３１７，最后將PA３１７產(chǎn)生的病毒顆粒導入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN １６ E６/E７中含有新霉素抗性，但未用G４１８篩選轉(zhuǎn)導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-２細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-２細胞基因組中含有E６/E７基因。 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
HK-2 [Human kidney] 人腎小管上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。 
細胞傳代方法：１：４傳代；２-３天換液１次 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁生長 
HK-2 [Human kidney] 人腎小管上皮細胞系
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。【材料和試劑】１)無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太小；５)準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。 
細胞形態(tài)特性：上皮樣 
ECC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞 
PLA801-95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞 
CD18/HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞 
SCCVII/St細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞 
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞 
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞 
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞 
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞 
P3X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞 
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞 
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞 
L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞 
IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞 
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞 
NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞 
NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞 
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞 
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞 
VMM5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞 
HK-2 [Human kidney] 人腎小管上皮細胞系
BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞 
RPMI-8226S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞 
F81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞 
H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞 
OACP4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞 
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞 
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞 
H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞 
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞 
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞 
MCF7/WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞 
PL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞 
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞 
SK MES 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞 
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞 
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞 
293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞 
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞 
ECC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞 
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞 
Hs 895 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞 
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞 
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞 
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞 
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞 
MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞 
KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞 
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞 
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞 
A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞 
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞 
FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞 
TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞 
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞 
CO115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞 
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞 
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞 
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞 
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞 
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞 
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞 
HK-2 [Human kidney] 人腎小管上皮細胞系
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞 
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞 
BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞 
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞 
RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞 
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞 
HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞 
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞 
Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞 
LAD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293FT細胞、HT-22細胞、UPCI-SCC-090細胞 
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細胞、OVCAR-420細胞、MDA-330細胞 
CD18/HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細胞、SuperTube細胞、H-1770細胞 
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