"RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細胞系
細胞背景資料：前列腺癌；C５７BL/６
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
PanC1細胞系相關產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
AC29細胞系相關產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
PL-5細胞系相關產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
MIN6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
CNE-2細胞系相關產(chǎn)品：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
LN382細胞系相關產(chǎn)品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
GC9811-P細胞系相關產(chǎn)品：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
MC116細胞系相關產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
huH 1細胞系相關產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
NB1-RGB細胞系相關產(chǎn)品：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
NCIN87細胞系相關產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
SUM102細胞系相關產(chǎn)品：CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞
OVCAR-8細胞系相關產(chǎn)品：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
L 363細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 3B細胞、P-388D1細胞、BHK21細胞
COLO 824細胞系相關產(chǎn)品：KY-270細胞、PK 15細胞、H2085細胞
B16F1細胞系相關產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
HN4細胞系相關產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
SNU-368細胞系相關產(chǎn)品：AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞
MN9D細胞系相關產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
OCILY7細胞系相關產(chǎn)品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
SW 900細胞系相關產(chǎn)品：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
NCTC clone 929細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
C2A細胞系相關產(chǎn)品：HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞
HeLa細胞系相關產(chǎn)品：Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細胞系
EAhy 926細胞系相關產(chǎn)品：SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
Hi-5細胞系相關產(chǎn)品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
NCIH460細胞系相關產(chǎn)品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
IFRS1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
SKCol1細胞系相關產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
RTMC細胞系相關產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
EoL-1-cell細胞系相關產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
KMS18細胞系相關產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
U-266 AR1細胞系相關產(chǎn)品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
AU-Mel細胞系相關產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
HUT 125細胞系相關產(chǎn)品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
DI-TNC1細胞系相關產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
PANC 813細胞系相關產(chǎn)品：HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
IMR32細胞系相關產(chǎn)品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
NCI-H865細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
HOS-143B細胞系相關產(chǎn)品：DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關產(chǎn)品：G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞
T47D細胞系相關產(chǎn)品：AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
HCC-1143細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
3AO細胞系相關產(chǎn)品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞
CAL-33細胞系相關產(chǎn)品：COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
A-101D細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
H-1838細胞系相關產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
HEMCSS細胞系相關產(chǎn)品：STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞
KMB 17細胞系相關產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
KP2細胞系相關產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
OSK-1細胞系相關產(chǎn)品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
Huh7.5細胞系相關產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
ECV-304細胞系相關產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
Capan-1細胞系相關產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌細胞系
FL83B細胞系相關產(chǎn)品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
SF763細胞系相關產(chǎn)品：H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
JHH-7細胞系相關產(chǎn)品：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
H2108細胞系相關產(chǎn)品：MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
SF-126細胞系相關產(chǎn)品：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
H889細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
X63-AG 8.653細胞系相關產(chǎn)品：LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
293 EBNA細胞系相關產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
LPC-H12細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞
BEND細胞系相關產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
T 84細胞系相關產(chǎn)品：SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞
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