"DH82 Thawing狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞背景資料：腎；Golden Retrieve
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
DH82 Thawing狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
DH82 Thawing狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
CoCL2細胞系相關產品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
CHL-CL-11細胞系相關產品：AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
H-2342細胞系相關產品：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞
SUPB-15細胞系相關產品：CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
SBC-5細胞系相關產品：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
ROS17/2.8細胞系相關產品：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關產品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
Hs 636 T細胞系相關產品：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
RPMI6666細胞系相關產品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
Sup T-1細胞系相關產品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
M-NFS-60細胞系相關產品：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
MCF 7B細胞系相關產品：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
HLE細胞系相關產品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關產品：NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞
SCL-1細胞系相關產品：MDA-MB-175-VII細胞、T-ALL-1細胞、RH30SJ細胞
PC-14細胞系相關產品：SW 982細胞、8226細胞、SK-MES1細胞
624 MEL細胞系相關產品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
MKN 45細胞系相關產品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
NT2-D1細胞系相關產品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
Hs 604.T細胞系相關產品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
Wien 133細胞系相關產品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
Wien 133細胞系相關產品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞系相關產品：NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
MHCC97L細胞系相關產品：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
MLMEC細胞系相關產品：U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
HS 445T細胞系相關產品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
DH82 Thawing狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
H-1930細胞系相關產品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
U-251_MG細胞系相關產品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
Alexander cells細胞系相關產品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
H-1793細胞系相關產品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
KYSE 510細胞系相關產品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
C8D1A細胞系相關產品：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關產品：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
SW839細胞系相關產品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
AtT20細胞系相關產品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
WM115F細胞系相關產品：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
PAI細胞系相關產品：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞
H-157細胞系相關產品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
Panc-1-P細胞系相關產品：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
NCI-H2591細胞系相關產品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
JC細胞系相關產品：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞
LS513細胞系相關產品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
U118MG細胞系相關產品：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
Ej138細胞系相關產品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
LS513細胞系相關產品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
MM1.S細胞系相關產品：TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
NS20Y細胞系相關產品：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關產品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
BEL 7402細胞系相關產品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
WM239細胞系相關產品：GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
H35細胞系相關產品：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
Chang liver細胞系相關產品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產品：DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
MCF7-CTRL細胞系相關產品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
SJ-Rh 30細胞系相關產品：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
SUSM1細胞系相關產品：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
SUDHL4細胞系相關產品：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
GC-1spg細胞系相關產品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
DH82 Thawing狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
Hep2細胞系相關產品：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
MCA205細胞系相關產品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
MCA205細胞系相關產品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
NCI-H526細胞系相關產品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
CAL33細胞系相關產品：RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
WiDrTC細胞系相關產品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
BEND細胞系相關產品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關產品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
Swiss 3T3細胞系相關產品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
H-2009細胞系相關產品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
SW-837細胞系相關產品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
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