"U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：U-２５１ MG分離至一位患者的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時(shí)，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
T-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞、BL-6細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
C-127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McARH7777細(xì)胞、TOV112細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞
NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞
RPE-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1.6細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞
SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2BBe細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Sol8細(xì)胞
2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
Giant Cell Tumor細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞
C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
GC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
SW620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
D341MD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞
hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞
KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞
THLE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
MCF10-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、SNU251細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞
HuH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細(xì)胞、DHL10細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞
J-774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞
JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞
RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞
JKT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞
IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
U-251MG Thawing人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
Hs-688A-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞
TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細(xì)胞、H-719細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
"