"MDBK Thawing牛腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MDBK Thawing牛腎細胞系
細胞生長：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDBK Thawing牛腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
AsPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞
OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
Madison 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
T/G HA VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細胞、OKT 3細胞、NIH:OVCAR-10細胞
3T6 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283-MED細胞、WEHI 3細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞
L-M(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
SNB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
MDBK Thawing牛腎細胞系
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
MB 157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
NCI-H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
W133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
NOMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
QBC(939)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
TE-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞
MOLT.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295細胞、A2780S細胞、DCS細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
KMST6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞
KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
MDBK Thawing牛腎細胞系
WEHI-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
LS-1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
SCC 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
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