"SNU-216 Thawing人胃癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SNU-216 Thawing人胃癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SNU-216 Thawing人胃癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
AG 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞
HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
C32 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
Hs-852-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細胞、IOSE 80細胞、HEK293-FT細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細胞、ketr 3細胞、GM00637細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
SUDHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
OVCAR-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
Y 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞
SNU-216 Thawing人胃癌細胞系
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
207細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
AQ-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
Ramos (RA)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
LU65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
MiaPaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
HUT 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
OVSAHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞
PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
SCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
MOLT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
SNU5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
U 138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
SNU-216 Thawing人胃癌細胞系
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞
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