"ID8 Thawing小鼠卵巢癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
ID8 Thawing小鼠卵巢癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ID8 Thawing小鼠卵巢癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
MDA134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
SF126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞
NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
BNL-CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細胞、AE 1201細胞、YD15細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細胞、Glioma-261細胞、SNK6細胞
NCI-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
Evsa T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
ID8 Thawing小鼠卵巢癌細胞系
SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
Walker-Ca.256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
U-226AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
GM05372E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
COLO394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞
H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
ID8 Thawing小鼠卵巢癌細胞系
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
UWB1.289細胞系相關(guān)產(chǎn)品：118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
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