"ONS-76 Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
ONS-76 Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ONS-76 Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞
hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
PG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
TE13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
Wistar Institute-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
WC00097細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
A2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
NMCG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVSMC細胞、MeWo細胞、NCI-H87細胞
H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H748細胞、L M (TK-)細胞、MBT2細胞
NCI-H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
U-373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
KP-N-RT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
Tj-905細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
ONS-76 Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
GM17346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
WM 451-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
A-375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
PA12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
Adeno 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞
Vero from pool #76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
H-1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
NCI-SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
ONS-76 Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
COV 504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
LS 123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
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