"SCaBER Thawing人鱗狀膀胱癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SCaBER Thawing人鱗狀膀胱癌細胞系
細胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
SCaBER Thawing人鱗狀膀胱癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
冷凍細胞解凍程序：依據細胞株數據單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
U-373-MG細胞系相關產品：MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
rUCMSCs細胞系相關產品：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關產品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關產品：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
H-295R細胞系相關產品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
KMS18細胞系相關產品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
RPMI8226/S細胞系相關產品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
HC11細胞系相關產品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
C-6細胞系相關產品：MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
KMB17細胞系相關產品：Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞
MV 3細胞系相關產品：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
RT112細胞系相關產品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
PC-9細胞系相關產品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
GM-637細胞系相關產品：BL1339細胞、PL9細胞、SK HEP-1細胞
DITNC1細胞系相關產品：GES-1細胞、Caki2細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
TK-1細胞系相關產品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
CEM-0細胞系相關產品：33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
EFO 27細胞系相關產品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
RFL-6細胞系相關產品：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
TCC Sup細胞系相關產品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
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U-87MG ATCC細胞系相關產品：BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞
V 79細胞系相關產品：Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
NFS-60細胞系相關產品：Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
SCaBER Thawing人鱗狀膀胱癌細胞系
Onda 11細胞系相關產品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
MGHU1細胞系相關產品：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
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SF 767細胞系相關產品：TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
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H-69細胞系相關產品：VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
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SW-579細胞系相關產品：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
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