"HSC-4 Thawing人口腔鱗癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HSC-4 Thawing人口腔鱗癌細胞系
細胞生長:貼壁
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1 x 10^5 cells/10cm dish
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HSC-4 Thawing人口腔鱗癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
AHH-1細胞系相關產品:Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
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BJAB細胞系相關產品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
H-2066細胞系相關產品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
MLFC細胞系相關產品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
SK-OV-433細胞系相關產品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
C-Li-7細胞系相關產品:SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
3AA細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
THLE2細胞系相關產品:7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
LuCL4細胞系相關產品:CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
TK.10細胞系相關產品:HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞
HCE細胞系相關產品:HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
NB-19細胞系相關產品:HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
RL細胞系相關產品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
H-660細胞系相關產品:P3X63細胞、NCIH2591細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
B 95.8細胞系相關產品:NS20Y細胞、Hs343T細胞、3T3J2細胞
SHG44細胞系相關產品:HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞
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LCD細胞系相關產品:NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
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HSC-4 Thawing人口腔鱗癌細胞系
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4T1-LUC細胞系相關產品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
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T. T細胞系相關產品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
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Mevo細胞系相關產品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
SKHEP1細胞系相關產品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
VERO C 1008細胞系相關產品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
NCI-H2081細胞系相關產品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
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HSC-4 Thawing人口腔鱗癌細胞系
NW38細胞系相關產品:H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關產品:VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
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