"RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞生長:貼壁
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,3-4天換液1次。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應該不低于5×105/ml。最后要做好標記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性:梭型和大的多核細胞
NuTu 19細胞系相關產(chǎn)品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
Madison細胞系相關產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
H4-II-EC3細胞系相關產(chǎn)品:SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
CEM-0細胞系相關產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
RPE1細胞系相關產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
BMU-S1細胞系相關產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞
PA1細胞系相關產(chǎn)品:Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關產(chǎn)品:Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
HCC95細胞系相關產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
LCLC-103H細胞系相關產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
A-498細胞系相關產(chǎn)品:Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞
CAL-51細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
AM38細胞系相關產(chǎn)品:RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
Hep-3B細胞系相關產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
NCIH747細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、E.G7-OVA細胞、HUC-1細胞
HN13細胞系相關產(chǎn)品:16-HBEo細胞、SU-DHL6細胞、B16 melanoma細胞
RMS 13細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
NB1RGB細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
Co-115細胞系相關產(chǎn)品:RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
LA 4細胞系相關產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
Hs729T細胞系相關產(chǎn)品:NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
Hs729T細胞系相關產(chǎn)品:NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
JHH2細胞系相關產(chǎn)品:DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
MAC1細胞系相關產(chǎn)品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
HEK (AD293)細胞系相關產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
KY-270細胞系相關產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
ECC 10細胞系相關產(chǎn)品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
ECV 304細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
Super Tube細胞系相關產(chǎn)品:SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
OCI-AML-4細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
LTEP-sm 1細胞系相關產(chǎn)品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
HSC-2細胞系相關產(chǎn)品:Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關產(chǎn)品:CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
MDA-MB-415細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
CAL-78細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
CHL1細胞系相關產(chǎn)品:MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關產(chǎn)品:SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
MARC-145細胞系相關產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
H2170細胞系相關產(chǎn)品:MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
COLO824細胞系相關產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
PLA802細胞系相關產(chǎn)品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
ST-2細胞系相關產(chǎn)品:SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
G519細胞系相關產(chǎn)品:NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
Hs 870.T細胞系相關產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
YAC細胞系相關產(chǎn)品:NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
RMS13細胞系相關產(chǎn)品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
HCC2185細胞系相關產(chǎn)品:BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
P3.653細胞系相關產(chǎn)品:Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
LU451細胞系相關產(chǎn)品:J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
H748細胞系相關產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
NCI-H596細胞系相關產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
624細胞系相關產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞
HT-22細胞系相關產(chǎn)品:HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
HEC-1-A細胞系相關產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
H1341細胞系相關產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
SCC-1395細胞系相關產(chǎn)品:mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
SKES-1細胞系相關產(chǎn)品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
SCLC-21H細胞系相關產(chǎn)品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
RD Thawing人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
RGM-1細胞系相關產(chǎn)品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
IOSE-Van細胞系相關產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
NCI-H650細胞系相關產(chǎn)品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
NCI.H23細胞系相關產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
Hepatoma-22細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
EM-3細胞系相關產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
ECC10細胞系相關產(chǎn)品:HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞
MFE-296細胞系相關產(chǎn)品:PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
UWB1.289細胞系相關產(chǎn)品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
H-508細胞系相關產(chǎn)品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
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