"NCI-H322 Thawing人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H322 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
預(yù)防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H322 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
H-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-661細胞、CAL62細胞、Tb1Lu細胞
R 2 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
HCC-1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細胞、SKMEL1細胞、M07e細胞
GFP-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE細胞、Tsup-1細胞、H-1435細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
NCI-H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞
Tu-177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
NCI-H322 Thawing人肺癌細胞系
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
McA-RH 8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞
GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
SP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
MDCKII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
CEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
NCIH2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
MX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細胞、ASH-3細胞、Lu-65細胞
ABC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
OCI Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
P30-OHKUBO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
NCI-H322 Thawing人肺癌細胞系
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
RD-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
CWR22-R1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
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