"HLE Thawing人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HLE Thawing人肝癌細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HLE Thawing人肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞
4T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
MKN7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG1細胞、HPAF/CD18細胞、H3396細胞
Hs 611.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、SHEE細胞、786O細胞
IPEC-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
McA-RH 8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
H-35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
HLE Thawing人肝癌細胞系
Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
LM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞
BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
MC26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
WM239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
HOP-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
H-1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞
THP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-226細胞、C2C12細胞、KMS-26細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
HOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
SK-N-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
HLE Thawing人肝癌細胞系
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
Human Embryo Lung-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞
PC-3M IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
GM03570細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
RWPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞
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