"JHH-7 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
JHH-7 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題,究竟是什么原因?qū)е?,我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決?以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過(guò)程中的問(wèn)題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng);3)對(duì)冷凍液過(guò)敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng),存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,并開(kāi)啟超凈臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái),以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開(kāi)的容器瓶口正上方操作,容器打開(kāi)后,傾斜45°操作,操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤(pán)2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤(pán)內(nèi)加入無(wú)菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺(tái)過(guò)濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
JHH-7 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
ZYM-DIEC02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞
CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
H4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
143B TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞
H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
CA922細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT4細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞
NCI-H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細(xì)胞、H-660細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
LLCPK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-Olig2細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞、SR-786細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞
HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞
SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞
H-196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC941122細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞
NCI-H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RCK8細(xì)胞
JHH-7 Thawing人肝癌細(xì)胞系
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
DH 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細(xì)胞、MEG01細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞
Human Microglia Clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細(xì)胞、SCL2細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞
PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞
G-402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-MMT-1細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞
MDA-MB 468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
Anglne細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COC1/CDDP細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞、GM03573細(xì)胞
MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞
Super Tube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞、TE5細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
NCIH146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H64細(xì)胞、A375SM細(xì)胞、293-F細(xì)胞
SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT8細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞、SUM159細(xì)胞
3T3 J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞、G-401細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞
KU-812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH 82細(xì)胞、Ly7細(xì)胞、H378細(xì)胞
JHH-7 Thawing人肝癌細(xì)胞系
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞
Hs746-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 4475細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞、KY-270細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
PANC0504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細(xì)胞、HIT細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞
T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
Panc_04_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細(xì)胞、J 111細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞
National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞
"