"A-704 Thawing人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
A-704 Thawing人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：４傳代，每周換液２-３次
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A-704 Thawing人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶。【材料和試劑】１)無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】１)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；５)準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面，再在鏡下觀察細(xì)胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞
T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞
mREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
HEC-1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞
MV411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
SW-1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa/S3細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞
HONE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、HEC151細(xì)胞
KATO 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WTRL1細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞
H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
OVCAR-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞
NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
A-704 Thawing人腎癌細(xì)胞系
OVCAR 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCC1細(xì)胞、HIEC細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
NCIH2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH-4細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H128細(xì)胞、HASMC細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞
SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞
R2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、SW-620細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
BHK21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97細(xì)胞、H2135細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞
Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞
RL952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞
HS-940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940-T細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、HSF2細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
751-NA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞、138MG細(xì)胞
Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞
NCI-H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSC4.1細(xì)胞、PT67細(xì)胞、H2108細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
A-704 Thawing人腎癌細(xì)胞系
MDA-MB-175-VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
Huh 7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞
Panc-327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細(xì)胞、SN12C細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞
FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
L-6 myoblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞
MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞
BCaP 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞
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