"EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
T-98G細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
LY細胞系相關產(chǎn)品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
SP-2細胞系相關產(chǎn)品：FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
NCIH2066細胞系相關產(chǎn)品：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
BEP2D細胞系相關產(chǎn)品：HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
SK-MEL-24細胞系相關產(chǎn)品：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
AN3-CA細胞系相關產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
NCI-H1792細胞系相關產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
ARPE-19細胞系相關產(chǎn)品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
SW 1222細胞系相關產(chǎn)品：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
SKUT-1細胞系相關產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關產(chǎn)品：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
HA1800細胞系相關產(chǎn)品：HUSMC細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
SO-Rb 50細胞系相關產(chǎn)品：293/EBNA細胞、FUOV1細胞、HB611細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關產(chǎn)品：H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
Hk-2細胞系相關產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
K7M2-WT細胞系相關產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
SupB15W細胞系相關產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
SupB15W細胞系相關產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
LS123細胞系相關產(chǎn)品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
HFB細胞系相關產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
SKML-28細胞系相關產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
SF-767細胞系相關產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細胞癌細胞系
HCASMC細胞系相關產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
COLO394細胞系相關產(chǎn)品：373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞
D283細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
Ej138細胞系相關產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
KHYG-1細胞系相關產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
FL62891細胞系相關產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
K-1735細胞系相關產(chǎn)品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
NCIH146細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
IMR32細胞系相關產(chǎn)品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
SW626細胞系相關產(chǎn)品：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
OCI-Ly03細胞系相關產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
HT-29細胞系相關產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
SK-MEL 28細胞系相關產(chǎn)品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
SUDHL-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關產(chǎn)品：TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
Line 522細胞系相關產(chǎn)品：H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
MDA-134細胞系相關產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
Cor L88細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
NIH3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
Hs675T細胞系相關產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
H-719細胞系相關產(chǎn)品：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
SNU182細胞系相關產(chǎn)品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
H1436細胞系相關產(chǎn)品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
CEM clone 7細胞系相關產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
TMK1細胞系相關產(chǎn)品：HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞
BLO11細胞系相關產(chǎn)品：H508細胞、H522細胞、C918細胞
mIMCD-3細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
SUDHL1細胞系相關產(chǎn)品：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
GL261細胞系相關產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
Hs852T細胞系相關產(chǎn)品：UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細胞癌細胞系
H-1693細胞系相關產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
MC/9細胞系相關產(chǎn)品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
KPL1細胞系相關產(chǎn)品：HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
FHs 74 Int細胞系相關產(chǎn)品：KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
E6-1細胞系相關產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
HOS (TE85)細胞系相關產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
NB19-RIKEN細胞系相關產(chǎn)品：MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
H1650_CO細胞系相關產(chǎn)品：SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
T9細胞系相關產(chǎn)品：PLA801D細胞、CWR22-R1細胞、NCIH250細胞
CL40細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
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