"T84 Thawing人結腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞系
細胞背景資料:T84細胞株是從一位72歲男性結腸癌患者的肺轉(zhuǎn)移灶建立的可移植人類癌細胞株。 腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠,并連續(xù)進行移植。 [26072] 在裸鼠身上的移植過程中,細胞株始終保持結腸癌的原始組織性狀。 [26072] 在無胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細胞株。 這些細胞單層生長到飽和并在接觸細胞間展現(xiàn)出緊密連接和橋粒。 [1155] 有很多關于多肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)并維持定向電解質(zhì)傳輸?shù)氖荏w。 [1155] 這株細胞展現(xiàn)了接觸細胞中的緊密連接和橋粒。 [1155] 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
T84 Thawing人結腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞系
細胞生長:貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周2次。
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網(wǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
T84 Thawing人結腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞,多角
GTL-16細胞系相關產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
A 72細胞系相關產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
WEHI231細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
ZR-75-30細胞系相關產(chǎn)品:EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
Vero 76細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
Hs-940細胞系相關產(chǎn)品:UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
PLC/PRF5細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
NCTC929細胞系相關產(chǎn)品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
EoL-1細胞系相關產(chǎn)品:MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
MAC1細胞系相關產(chǎn)品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
SNU-739細胞系相關產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
SUP-B15細胞系相關產(chǎn)品:NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
Natural Killer-92細胞系相關產(chǎn)品:BrCL15細胞、Kit225 K6細胞、MN60細胞
U-87MG細胞系相關產(chǎn)品:D341Med細胞、H-441細胞、HO8910PM細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
H1092細胞系相關產(chǎn)品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
COS7細胞系相關產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
Ca761細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品:X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品:X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
HCT116細胞系相關產(chǎn)品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
U-87 MG細胞系相關產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
HCC-1569細胞系相關產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
WIL2S細胞系相關產(chǎn)品:TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
T84 Thawing人結腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞系
H-292細胞系相關產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
MDA-MB453細胞系相關產(chǎn)品:CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞
MDA-MB-361細胞系相關產(chǎn)品:LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
ME16C細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品:2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
U266細胞系相關產(chǎn)品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品:SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
NCIH520細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
SKNO-1細胞系相關產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
SKMEL5細胞系相關產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
T 98 G細胞系相關產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
V79-4細胞系相關產(chǎn)品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
HKC細胞系相關產(chǎn)品:SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
SKG IIIa細胞系相關產(chǎn)品:HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
NCIH209細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
Jurkat E6-1細胞系相關產(chǎn)品:CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
Panc813細胞系相關產(chǎn)品:Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
Tu-212細胞系相關產(chǎn)品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
MFE-280細胞系相關產(chǎn)品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
NHEK細胞系相關產(chǎn)品:MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
SG231細胞系相關產(chǎn)品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
NTera 2細胞系相關產(chǎn)品:N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
CCD 966SK細胞系相關產(chǎn)品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
U937細胞系相關產(chǎn)品:Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
HFLS-OA細胞系相關產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品:MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
H-87細胞系相關產(chǎn)品:Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞
BEL 7405細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
HRA 19細胞系相關產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品:FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
T84 Thawing人結腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞系
BT 325細胞系相關產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
CMT 167細胞系相關產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
SUDHL-8細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
22Rv1細胞系相關產(chǎn)品:MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
G422細胞系相關產(chǎn)品:SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
U-251-MG細胞系相關產(chǎn)品:SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
RGC6細胞系相關產(chǎn)品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關產(chǎn)品:MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
HEK293-F細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
HT1197細胞系相關產(chǎn)品:190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
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