"SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】1)掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液1-2次
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
D283-MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細胞、DU_145細胞、JEG3細胞
DSL-6A-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、L- cell細胞
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
NCI-H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
HCT116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
Colon26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
CCD 841 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞
TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
RD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
OKAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
Caco 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞
SW948 Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
Hs742T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞
MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
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