"NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細胞系
細胞背景資料：NR８３８３(正常大鼠，１９８３年８月３日)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約８-９個月。隨后，不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR８３８３細胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現(xiàn)出巨噬細胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，F(xiàn)c受體，氧化降解；分泌IL-１,TNFbeta和IL-６，可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR８３８３細胞響應(yīng)博萊霉素，分泌TGFbeta前體。在博萊霉素刺激下，TGFbe
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細胞系
細胞生長特性：半貼壁生長
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】１)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞形態(tài)特性：巨噬細胞
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
Farage OL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
PG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
SC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
Huh 7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細胞、mRTEC細胞、DSL6A/C1細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細胞、SUM-102PT細胞、MMAc-Serum Free細胞
RIN Cl-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細胞系
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
U251n細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
KNS-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1876細胞、RS1細胞、BRL 3A細胞
H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
NCI-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
SU 86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
HCC202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
ATN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
KYSE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
TF-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
SUM159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
NR8383 Thawing大鼠肺泡巨噬細胞系
OCM1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
P3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
HepaRG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
HIT.T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
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