"Vero Thawing非洲綠猴腎細胞系
細胞背景資料：Vero細胞株是日本千葉大學(xué)的YasumuraY和KawakitaY從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細胞常作為轉(zhuǎn)染宿主，用于支原體的檢測。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
Vero Thawing非洲綠猴腎細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Vero Thawing非洲綠猴腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
WM451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
FUOV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
SKNBE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
MeT5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
32D/cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
SW780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
Kit225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0細胞、HCCC9810細胞、NCIH1568細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細胞、Farage Original Line細胞、Z-138細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
FAO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
FAO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
NK-92 MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
Vero Thawing非洲綠猴腎細胞系
Keio University-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
ETCC-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
NCI/ADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞
TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
IAR 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
GM03569D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
Hep3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
SJRH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
NGP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
Vero Thawing非洲綠猴腎細胞系
JEKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
OE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
D-324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
HEK293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞
NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
HCE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
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