"RL95-2 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料:這些細胞有α角蛋白,定義明確的連接復(fù)合體,張力絲和表面微絨毛。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
RL95-2 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
傳代的操作步驟注意事項:1)操作前要洗手,進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈,操作在火焰附近進行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟:1)吸出細胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RL95-2 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞
NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
DOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
253J-BV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細胞、B35細胞、SCL II細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細胞、MDA468細胞、MDA-453細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
Capan2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
SKBR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
RL95-2 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
Fetal Human Colon細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
MIA Paca2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞
Hs729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
K562/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
KYSE0410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞
NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
SUDHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
SUDHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞
MCA38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
MRC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞
SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
SK RC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞
LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
COR-L105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
RL95-2 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
RAW264細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
H647ell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
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