"PL45 Thawing人胰腺導管腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
PL45 Thawing人胰腺導管腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PL45 Thawing人胰腺導管腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
HSC-T6細胞系相關產品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
U-251細胞系相關產品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
KE 37細胞系相關產品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
MAVER1細胞系相關產品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
MDA-MB231細胞系相關產品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
NFHIOSE-80細胞系相關產品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
CPA47細胞系相關產品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
EOC-20細胞系相關產品:SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
10T1/2細胞系相關產品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關產品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
NCI-SNU-761細胞系相關產品:293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
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BEP2D細胞系相關產品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
MH-22a細胞系相關產品:High-5細胞、Mono-Mac-6細胞、WERI-Rb 1細胞
16-HBE14o細胞系相關產品:SN12-PM6細胞、UMUC14細胞、NCI-H2171細胞
VM-CUB-1細胞系相關產品:BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
SNU398細胞系相關產品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
NCIH211細胞系相關產品:NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
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SK-N-FI細胞系相關產品:Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞
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KBM7細胞系相關產品:C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
Swiss/3T3細胞系相關產品:Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞
RTE細胞系相關產品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
PL45 Thawing人胰腺導管腺癌細胞系
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GC-2spd(ts)細胞系相關產品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
B95-8細胞系相關產品:TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞
AML-12細胞系相關產品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
NCI-BL2141細胞系相關產品:UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
Hs 766.T細胞系相關產品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
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SC細胞系相關產品:DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞
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GTL-16細胞系相關產品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
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B16/F10細胞系相關產品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
H2286細胞系相關產品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
MKN74細胞系相關產品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
NPA細胞系相關產品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
CCD-112 CoN細胞系相關產品:266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關產品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
SCC4細胞系相關產品:COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
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Fetal Human Colon細胞系相關產品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
HS-695T細胞系相關產品:HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
Z138細胞系相關產品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關產品:Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
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PL45 Thawing人胰腺導管腺癌細胞系
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