"KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細胞瘤。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
Colon 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
H-1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
Hs294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、JVM3細胞、V-79-4細胞
JHH-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細胞、NCI-H1954細胞、RMS1598細胞
H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
HCC-1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞
MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞
W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
AK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
GAK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞
293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
FUOV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
MLTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV3細胞、HemECs細胞、SK N SH細胞
HCC-1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞
KP-N-NS Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞
H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞
BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
C518細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
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