"Calu-1 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
Calu-1 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書,包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細(xì)胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了;3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長的慢,買個(gè)支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:消化10分鐘。1:2。3-4天長滿
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題,一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法,希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助:1)觀察細(xì)胞狀態(tài):貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%,即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài);2)細(xì)胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細(xì)胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細(xì)胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí),立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài),至細(xì)胞成流沙狀完全脫落,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細(xì)胞離心:將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細(xì)胞凍存:離心后去除細(xì)胞上清液,按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中,進(jìn)行凍存;6)細(xì)胞保藏:凍存管做好標(biāo)記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Calu-1 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題,很多時(shí)候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
BCaP-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-FET細(xì)胞、High Five細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞
SVOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細(xì)胞、HCC94細(xì)胞、B10BR細(xì)胞
QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
RERF-LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1882細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞
SW 962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
WBF344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
TE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞、DLM8細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、HCC94細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
Hs-746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZAWA細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞
PC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細(xì)胞、HOP92細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞
Pfeiffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
Mahlavu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag14細(xì)胞、MB468細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIHA細(xì)胞、H-1437細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞
Calu-1 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
NCIH1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP-9細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞
S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞
PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞
KTCTL-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
PLC-PRF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞
TR146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、T98 G細(xì)胞、TF-1細(xì)胞
T-47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149 PT細(xì)胞、HT115細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
HBE 135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
Calu-1 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞
BDCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
U14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IFRS1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、H-1838細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
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