"DLD-1 Thawing人結(jié)直腸腺癌上皮細胞系
細胞背景資料:DLD-1是1977-1979年間D.L.Dexter和同事分離的兩株結(jié)直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNAfingerprinting和染色體組型分析表明這株細胞與HCT-15(CCL-225)相似,說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。他們的遺傳起源可通過DNAfingerprinting證實,但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標記一致改變或數(shù)目上一致改變。細胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細胞的p53抗原表達呈陽性(p53抗原產(chǎn)生了一個C->
細胞形態(tài):上皮細胞樣
DLD-1 Thawing人結(jié)直腸腺癌上皮細胞系
細胞生長:貼壁
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時細胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中;2)不適當?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g(shù),并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大小:一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中;2)細胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化5分鐘。1:2。4-5天長滿。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DLD-1 Thawing人結(jié)直腸腺癌上皮細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?!静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分裝于15 ml無菌離心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回溫;3)新鮮培養(yǎng)基;4)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染;4)點燃酒精燈:注意火焰不能太小;5)準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶;6)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi);7)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞:注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞;8)打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
DLM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
P3/NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
OCI-Ly07細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細胞、MFE-280細胞、J774 A1細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細胞、L Wnt-3A細胞、T24(ECV304)細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
SNU-368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
DLD-1 Thawing人結(jié)直腸腺癌上皮細胞系
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
Pt-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
U266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
NCI-H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
BPH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
TE13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
NCIH2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
HCT.116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
DLD-1 Thawing人結(jié)直腸腺癌上皮細胞系
SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
HeLa-S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、P3-X63-Ag8細胞、SW 579細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞
MDCK II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
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