"ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細(xì)胞傳代時建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化,對于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化,細(xì)胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進(jìn)行,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機(jī)會。胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟:消化過度細(xì)胞碎片增多,黑渣子增多,細(xì)胞會成片脫落,嚴(yán)重影響細(xì)胞活性,并有部分細(xì)胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復(fù)凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。對于新購買的細(xì)胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常見培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細(xì)胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對細(xì)胞本身也有一定影響,因此為避免誘導(dǎo)抗藥細(xì)菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細(xì),并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進(jìn)行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞
HL 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細(xì)胞、B-104細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞
PNT-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40 MES 13細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞
HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
HLEC-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
GM00637H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞
NCI-ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞
NCI-ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞
C6661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞、NS1細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
MM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
TU 686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
TJ905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞
NK-92.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
SW-948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1573細(xì)胞、CL-34細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
hFOB 1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞
PNT1-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細(xì)胞、GC-1細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
NCI-H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞
Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞
MKN7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 1細(xì)胞、HS-445細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
COLO 206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
DMS-273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞
H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞
SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞
NCIH1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-565細(xì)胞、H498細(xì)胞、H-847細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK Type II細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、G422細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、MJ細(xì)胞
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