"EBC-1 Adherent人肺鱗癌細胞系
細胞背景資料:肺鱗癌;皮膚轉(zhuǎn)移;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
EB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞
細胞生長特性:貼壁
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
OCM1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細胞系
MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
WRL-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
M07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
LK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
HLFa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
C643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞
PCI-4M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
HEK-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞
H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
EBC-1 Adherent人肺鱗癌細胞系
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
451-LU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、GC-2spd(ts)細胞、Normal fibroblast-10細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、Hs840_T細胞、DMS273細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、NCI-H2073細胞、RASMCs細胞
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