"BSC40 Adherent非洲綠猴腎細胞系
細胞背景資料:腎;自發(fā)永生
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BSC40 Adherent非洲綠猴腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
RPMI 7666細胞系相關產(chǎn)品:DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
NB1-RGB細胞系相關產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
EO771細胞系相關產(chǎn)品:NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GP2d細胞系相關產(chǎn)品:CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
IMCD-3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
H-1581細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
細胞生長特性:貼壁
BSC40 Adherent非洲綠猴腎細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
LA-N-5細胞系相關產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
CAL85-1細胞系相關產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
SUDHL-2細胞系相關產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
SUM-102PT細胞系相關產(chǎn)品:MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
T-CAM2細胞系相關產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
SuDHL 1細胞系相關產(chǎn)品:HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
RPMI-2650細胞系相關產(chǎn)品:BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
U266-B1細胞系相關產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
PLA801-95D細胞系相關產(chǎn)品:SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
HBL 100細胞系相關產(chǎn)品:RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
BSC40 Adherent非洲綠猴腎細胞系
Glioma-261細胞系相關產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
Hs445細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
Hs445細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
R D細胞系相關產(chǎn)品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
MBdSMC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
MFE280細胞系相關產(chǎn)品:EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
HCC1171細胞系相關產(chǎn)品:Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
NCIH1184細胞系相關產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
NCIH2227細胞系相關產(chǎn)品:OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
BNL-HCC細胞系相關產(chǎn)品:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
KPL1細胞系相關產(chǎn)品:HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
TE354.T細胞系相關產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
R 1610細胞系相關產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
OCI-Ly03細胞系相關產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
NOR-10細胞系相關產(chǎn)品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關產(chǎn)品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
32D CL3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關產(chǎn)品:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
Hs940.T細胞系相關產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
Panc-03.27細胞系相關產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品:U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
AML-12細胞系相關產(chǎn)品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
Jurkat細胞系相關產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
B16 BL6細胞系相關產(chǎn)品:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
AU-565細胞系相關產(chǎn)品:LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
HCV29細胞系相關產(chǎn)品:GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
LS 1034細胞系相關產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
Clone Y-1細胞系相關產(chǎn)品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
OCILY-10細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
SV-HUC細胞系相關產(chǎn)品:AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
MOVAS-1細胞系相關產(chǎn)品:Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
HIT-T15細胞系相關產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
KAT5細胞系相關產(chǎn)品:HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
JROECL 33細胞系相關產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
MMAc-SF細胞系相關產(chǎn)品:HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
H2227細胞系相關產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關產(chǎn)品:OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
3T3-Swiss細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
MEC-1細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
BSC40 Adherent非洲綠猴腎細胞系
GM04154B細胞系相關產(chǎn)品:CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
NL20SV細胞系相關產(chǎn)品:MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
CTX TNA2細胞系相關產(chǎn)品:JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
HEK 293-F細胞系相關產(chǎn)品:TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
HEK 293 c18細胞系相關產(chǎn)品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
D407 RPE細胞系相關產(chǎn)品:NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
HTori 3細胞系相關產(chǎn)品:P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
LLC細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
BE2-C細胞系相關產(chǎn)品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
S16細胞系相關產(chǎn)品:MS751細胞、HOPC細胞、NCI-H322T細胞
VM Cub 1細胞系相關產(chǎn)品:INS1E細胞、DHL6細胞、hFOB細胞
CAL85-1細胞系相關產(chǎn)品:COLO-684細胞、CCD-841CoN細胞、RGE細胞
"