"SW1783 Adherent人腦星形膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料:間變性星形細胞瘤;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SW1783 Adherent人腦星形膠質(zhì)瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
R1610細胞系相關產(chǎn)品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
ZR751細胞系相關產(chǎn)品:PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
CAL851細胞系相關產(chǎn)品:CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UACC-893細胞系相關產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
CTLL(2)細胞系相關產(chǎn)品:KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
H2342細胞系相關產(chǎn)品:HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
細胞生長特性:貼壁
SW1783 Adherent人腦星形膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
IOSE 80細胞系相關產(chǎn)品:H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品:FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
B16BL-6細胞系相關產(chǎn)品:MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
TE671細胞系相關產(chǎn)品:AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
PIG3細胞系相關產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
WM-239A細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
Tissue Culture-1細胞系相關產(chǎn)品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
NCIH1915細胞系相關產(chǎn)品:SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
OACP4C細胞系相關產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
H1385細胞系相關產(chǎn)品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
hs 68細胞系相關產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
OVCAR-420細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
NBLAN5T細胞系相關產(chǎn)品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
SW1783 Adherent人腦星形膠質(zhì)瘤細胞系
Hs940T細胞系相關產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
JS1細胞系相關產(chǎn)品:786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
SNU119細胞系相關產(chǎn)品:MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
SNU119細胞系相關產(chǎn)品:MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關產(chǎn)品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
COR-L105細胞系相關產(chǎn)品:HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
HCC-15細胞系相關產(chǎn)品:MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
GM03571細胞系相關產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
SW839細胞系相關產(chǎn)品:RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
Melan-a細胞系相關產(chǎn)品:HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
HC-11細胞系相關產(chǎn)品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞
NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
786-O細胞系相關產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
H748細胞系相關產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
RH-35細胞系相關產(chǎn)品:H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
HOP-92細胞系相關產(chǎn)品:L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
HEP-3B2細胞系相關產(chǎn)品:CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
NCI-H740細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
BC-021細胞系相關產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
Daudi細胞系相關產(chǎn)品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
H-28細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
BL2141細胞系相關產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞
NCI-SNU-886細胞系相關產(chǎn)品:SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞
Renal Carcinoma細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞
PL 5細胞系相關產(chǎn)品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
SNB19細胞系相關產(chǎn)品:TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
R 2 C細胞系相關產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
EFM-192B細胞系相關產(chǎn)品:NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
L5178Y細胞系相關產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
FHC細胞系相關產(chǎn)品:HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
NuTu 19細胞系相關產(chǎn)品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
Ly1細胞系相關產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
H-1522細胞系相關產(chǎn)品:KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
CMEC/D3細胞系相關產(chǎn)品:DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
U 138 MG細胞系相關產(chǎn)品:A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
TE-85細胞系相關產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
Karpas 299細胞系相關產(chǎn)品:HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
IOSE-29細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
OSC-19細胞系相關產(chǎn)品:BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
KM12-SM細胞系相關產(chǎn)品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
SK Col 1細胞系相關產(chǎn)品:KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞
SW1783 Adherent人腦星形膠質(zhì)瘤細胞系
0V-1063細胞系相關產(chǎn)品:A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
Human Liver-7702細胞系相關產(chǎn)品:JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
GOS3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
SHP77細胞系相關產(chǎn)品:HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
Ra #1細胞系相關產(chǎn)品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
Jurkat E6-1細胞系相關產(chǎn)品:CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
CORL105細胞系相關產(chǎn)品:HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
NCI-H1770細胞系相關產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
CFPAC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH524細胞、HCA 7細胞、NCI-H1563細胞
H295細胞系相關產(chǎn)品:T173細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
B16BL-6細胞系相關產(chǎn)品:MMQ細胞、RN細胞、SVEC4-10細胞
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