"SG231 Adherent人膽管上皮癌細胞系
細胞背景資料：肝內(nèi)膽管癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SG231 Adherent人膽管上皮癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
SKM-1細胞系相關產(chǎn)品：HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
HRA-19細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
H820細胞系相關產(chǎn)品：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hs832T細胞系相關產(chǎn)品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
Det 562細胞系相關產(chǎn)品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
JM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
細胞生長特性：貼壁
SG231 Adherent人膽管上皮癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
CAL-27細胞系相關產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
CCD-19Lu細胞系相關產(chǎn)品：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品：C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
SMMC 7721細胞系相關產(chǎn)品：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞
NCI-H2591細胞系相關產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
CCRF-SB細胞系相關產(chǎn)品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞
SCL I細胞系相關產(chǎn)品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
Granta519細胞系相關產(chǎn)品：TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
H35細胞系相關產(chǎn)品：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
Walker-Ca.256細胞系相關產(chǎn)品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
AK細胞系相關產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞
OCILY-3細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
hTERT-HME1細胞系相關產(chǎn)品：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
SG231 Adherent人膽管上皮癌細胞系
NCI-H1930細胞系相關產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
CT26.WT細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
TW01細胞系相關產(chǎn)品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
TW01細胞系相關產(chǎn)品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
MV4:11細胞系相關產(chǎn)品：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
MDA-MB-330細胞系相關產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
PC3M細胞系相關產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
FHL 124細胞系相關產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
Y79細胞系相關產(chǎn)品：CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
UMRC-2細胞系相關產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
WPE-int細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
H-865細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
ROS1728細胞系相關產(chǎn)品：T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞
B-3細胞系相關產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
HSKMC細胞系相關產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
H2107細胞系相關產(chǎn)品：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
HCC1954細胞系相關產(chǎn)品：MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
Earle's L cells細胞系相關產(chǎn)品：MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞
COS1細胞系相關產(chǎn)品：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
HCEC細胞系相關產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
SKCO-1細胞系相關產(chǎn)品：FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關產(chǎn)品：PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
639-V細胞系相關產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
HT-29細胞系相關產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
RLE-6TN細胞系相關產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
SNU520細胞系相關產(chǎn)品：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
GM03190A細胞系相關產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
NCIH128細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
SHI-1細胞系相關產(chǎn)品：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
A549 ATCC細胞系相關產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
QGY-7701細胞系相關產(chǎn)品：CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
ECC-10細胞系相關產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
0V-1063細胞系相關產(chǎn)品：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
JEG-3細胞系相關產(chǎn)品：H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
JF305細胞系相關產(chǎn)品：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
HMCB細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
NBL-5細胞系相關產(chǎn)品：RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞
RTE細胞系相關產(chǎn)品：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
MA-104細胞系相關產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
SG231 Adherent人膽管上皮癌細胞系
A549細胞系相關產(chǎn)品：D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
OVTOKO細胞系相關產(chǎn)品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
CAOV3細胞系相關產(chǎn)品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
HELF細胞系相關產(chǎn)品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
HCS-2/8細胞系相關產(chǎn)品：293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
SHP77細胞系相關產(chǎn)品：HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
AML 12細胞系相關產(chǎn)品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
UMRC2細胞系相關產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
HCC0038細胞系相關產(chǎn)品：U-373MG細胞、U-138MG細胞、SW 756細胞
NCI H226細胞系相關產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、NCI-H1436細胞、CCRFCEM細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品：C4I細胞、M109細胞、CCLP1細胞
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