"DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
細胞背景資料：結(jié)直腸癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明：成纖維細胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時，細胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?，F(xiàn)象，常見的細胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中，因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細胞死去，稱為細胞的病理死亡，或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡；細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細胞死亡機理，如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況，一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡，是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程，無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用，在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
NCTC 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
UMUC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
細胞生長特性：貼壁
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
NCI-SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
COR-L26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
ME 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞
686LN-M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
HCE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞
TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞
H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
U-87MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞
SCL II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞
Hs 737.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
P30/0HK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
H-2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
H-1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
H647ell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
MAD109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
LU65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
HLCL9B10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
C6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞
DiFi Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
RT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞
Hs 766細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞
GI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細胞、hTERT-HME-1細胞、SK-N-BE細胞
NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細胞、KM-12細胞、3T3(A31)細胞
KYSE0410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細胞、TSU-Pr1細胞、MDA-MB 231細胞
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