"SNU-719 Adherent人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胃癌；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SNU-719 Adherent人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞
WEHI-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞
HARA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCCT1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞
PC-3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
SNU-719 Adherent人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
RL952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞
GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞
SNU-719 Adherent人胃癌細(xì)胞系
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞
SUM149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞
CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞
251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
SW954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、HCC15細(xì)胞
H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D:A細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、H-1666細(xì)胞
RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
NCI-H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rh30細(xì)胞、H-660細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
SP-2/0-AG14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細(xì)胞、MN60細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞
RCC_7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、OLN93細(xì)胞
OCI-AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞
BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞
MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞
MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA1細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞
HCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2B細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞
L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
HT 1376.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞
G361mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 267細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞
X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞
SNU520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2170細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
HEK293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343-MG細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞
JIMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞
SNU-719 Adherent人胃癌細(xì)胞系
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
HEK 293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs870T細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.7細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、H283細(xì)胞
HT 1376.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
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