"PLA-801C Adherent人肺巨細胞癌細胞系
細胞背景資料：肺巨細胞癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PLA-801C Adherent人肺巨細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
YD15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞
細胞生長特性：貼壁
PLA-801C Adherent人肺巨細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
SKNBE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞
H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
NCI-H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
PLA-801C Adherent人肺巨細胞癌細胞系
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
H-548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
HPAFII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
H-196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞
RIN-14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
A2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
PVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
H-1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞
LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
HM06.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞
Duke University 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
PLA-801C Adherent人肺巨細胞癌細胞系
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
NCI-H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、H-87細胞、NK10a細胞
LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細胞、Duke University 145細胞、SKOV-3細胞
SKNBE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、H1648細胞
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