"M21 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
M21 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
LLC1細胞系相關產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
ECC-1細胞系相關產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
Reuber H35細胞系相關產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CEMC1細胞系相關產(chǎn)品：DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
Tb1Lu細胞系相關產(chǎn)品：J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
BHK21細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
細胞生長特性：貼壁
M21 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
KYSE140細胞系相關產(chǎn)品：H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
T8細胞系相關產(chǎn)品：Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關產(chǎn)品：PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
mREC細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
HEK-A細胞系相關產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
RT4細胞系相關產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
NCIH1573細胞系相關產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
HEC-1-B細胞系相關產(chǎn)品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
MV411細胞系相關產(chǎn)品：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
LS 174T細胞系相關產(chǎn)品：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
GM03190細胞系相關產(chǎn)品：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
M21 Adherent人黑色素瘤細胞系
H1623細胞系相關產(chǎn)品：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞
MOLM16細胞系相關產(chǎn)品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
NCIH526細胞系相關產(chǎn)品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
LX-2細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
OVCAR-432細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
NR-8383細胞系相關產(chǎn)品：SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
NCI-H727細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
OVCAR 4細胞系相關產(chǎn)品：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
TPC1細胞系相關產(chǎn)品：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
NCIH2286細胞系相關產(chǎn)品：IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
HELA-GFP細胞系相關產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
CL34細胞系相關產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞系相關產(chǎn)品：H128細胞、HASMC細胞、NCI-H1299細胞
SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
R2C細胞系相關產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞
MOLT 3細胞系相關產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
130-T細胞系相關產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
Hs-695-T細胞系相關產(chǎn)品：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
RL952細胞系相關產(chǎn)品：MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞
HS-940-T細胞系相關產(chǎn)品：Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
Swiss-3T3細胞系相關產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
TE14細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
OUMS-27細胞系相關產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
751-NA細胞系相關產(chǎn)品：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞
Panc3_27細胞系相關產(chǎn)品：PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞
P36細胞系相關產(chǎn)品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
LCLC-103H細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
GM16136細胞系相關產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
NCI-H82細胞系相關產(chǎn)品：VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞
JIMT細胞系相關產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
PTK2細胞系相關產(chǎn)品：JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞
AM細胞系相關產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
TE14細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
Huh 7.5細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
Panc-327細胞系相關產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
FaDu細胞系相關產(chǎn)品：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
Tsup-1細胞系相關產(chǎn)品：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
Panc_03_27細胞系相關產(chǎn)品：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
M21 Adherent人黑色素瘤細胞系
SNU-16細胞系相關產(chǎn)品：2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
L-6 myoblast細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
MV522細胞系相關產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
BCaP 37細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
769-P細胞系相關產(chǎn)品：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
GP-293細胞系相關產(chǎn)品：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞
SUPT-1細胞系相關產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
SW 982細胞系相關產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
SW-1271細胞系相關產(chǎn)品：HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
HONE1細胞系相關產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、Bat lung細胞、HEC151細胞
KATO 3細胞系相關產(chǎn)品：WTRL1細胞、KYSE270細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關產(chǎn)品：PAMC82細胞、KMST-6細胞、PGLH7細胞
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