"M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
LS-411N細胞系相關產品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
JeKo-1細胞系相關產品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
Colo320細胞系相關產品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
HEK-AD293細胞系相關產品：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞
H2052細胞系相關產品：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
WRL68細胞系相關產品：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
細胞生長特性：貼壁
M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
DHL-4細胞系相關產品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
U 138 MG細胞系相關產品：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
NFHIOSE-80細胞系相關產品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
ME-180細胞系相關產品：B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞
NHRF細胞系相關產品：D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
RPMI-6666細胞系相關產品：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
A549細胞系相關產品：D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
CALU 1細胞系相關產品：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
H-1836細胞系相關產品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
WEHI 3細胞系相關產品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
Panc02細胞系相關產品：P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
K562細胞系相關產品：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
H522細胞系相關產品：HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
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16-HBE14o細胞系相關產品：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞
RL95-2細胞系相關產品：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
A 2058細胞系相關產品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
A 2058細胞系相關產品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
SK N SH細胞系相關產品：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
MGH-U1細胞系相關產品：OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
D283細胞系相關產品：SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞
RMG-1細胞系相關產品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
GTL 16細胞系相關產品：FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
YD-38細胞系相關產品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
WM451Lu細胞系相關產品：HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
B78細胞系相關產品：RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
Hs 604.T細胞系相關產品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
NCIH1648細胞系相關產品：NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
H-1869細胞系相關產品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
RPMI-6666細胞系相關產品：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞系相關產品：NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
SNU-1040細胞系相關產品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
RM-1細胞系相關產品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
KP-N-NS細胞系相關產品：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
Karpas 422細胞系相關產品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
COLO320HSR細胞系相關產品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
SKRC-52細胞系相關產品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
KCL22細胞系相關產品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
CHOS細胞系相關產品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
MM1.S細胞系相關產品：TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
H.Ep. #2細胞系相關產品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
HUC細胞系相關產品：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
786O細胞系相關產品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
HSC6細胞系相關產品：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
OCI AML3細胞系相關產品：SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
NCI H295R細胞系相關產品：NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關產品：HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
H-2029細胞系相關產品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
H847細胞系相關產品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
L363細胞系相關產品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
MC116細胞系相關產品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
DAN-G細胞系相關產品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
LNT-229細胞系相關產品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
NCIH226細胞系相關產品：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
C3H/10T1/2細胞系相關產品：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
SW837細胞系相關產品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
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3-LL細胞系相關產品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
HuH7細胞系相關產品：CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
PC 61-5-3細胞系相關產品：GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
TOV112D細胞系相關產品：MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞
GM17346細胞系相關產品：A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
H.Ep. #2細胞系相關產品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
BI-Mel細胞系相關產品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
HDMEC細胞系相關產品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
PC-9/S1細胞系相關產品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關產品：Meat Animal Research Center-145細胞、SF295細胞、LAC細胞
CEM細胞系相關產品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、C-Li-7細胞、SNU-182細胞
NFHIOSE-80細胞系相關產品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、SW13細胞、PLA801D細胞
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