"HUVEC-C[HUVEC] Adherent人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：臍靜脈；內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時收獲細(xì)胞，計數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞
HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞
MES 23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2A細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
NCI-SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞、H-1417細(xì)胞
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
OCI Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1437細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞
MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞
HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞
GA-10(Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERTHME1細(xì)胞、UCH1細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞
KP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細(xì)胞、PAa細(xì)胞、NRCC細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞
32D clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A875細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、N-9細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞
SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞
HH [Human lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1184細(xì)胞、H-1882細(xì)胞、C2A細(xì)胞
HEK 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR 146細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞
OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
REC 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-4006細(xì)胞、U266B1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
BEL 7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo205細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞
16-HBE14o細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12-PM6細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞
BC-PAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞
TM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞
B95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32.T細(xì)胞、CoC1細(xì)胞、118MG細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
OVCAR.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-446細(xì)胞、HCM細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞
SCC 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞
KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC] Adherent人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞
ARO81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS2細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞
MM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞
SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞
LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細(xì)胞、ESC細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
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