"FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細胞系
細胞背景資料：甲狀腺；自發(fā)永生；Fischer
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
BPH1細胞系相關產(chǎn)品：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
OP9細胞系相關產(chǎn)品：SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
NCI-H526細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CFSC-2G細胞系相關產(chǎn)品：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
H-2170細胞系相關產(chǎn)品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
RN-c細胞系相關產(chǎn)品：BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
細胞生長特性：貼壁
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
G-292 clone A141B1細胞系相關產(chǎn)品：EB2細胞、NCIH244細胞、LLC1細胞
NCIH211細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
GM15452細胞系相關產(chǎn)品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
SNU620細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
SCC 4細胞系相關產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
MC3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
TALL 1細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞
SUDHL16細胞系相關產(chǎn)品：NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
H-889細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
COR L279細胞系相關產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
TE-7細胞系相關產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
WI 38細胞系相關產(chǎn)品：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細胞系
U266B1細胞系相關產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關產(chǎn)品：UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
MCF 7細胞系相關產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
MCF 7細胞系相關產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
HECCL-1細胞系相關產(chǎn)品：K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
H-748細胞系相關產(chǎn)品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
TE9細胞系相關產(chǎn)品：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞
NFS 60細胞系相關產(chǎn)品：CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
OCI/AML-2細胞系相關產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
KYSE30細胞系相關產(chǎn)品：MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞
MDA231-LM2細胞系相關產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
OVCAR4細胞系相關產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
OCI-LY-3細胞系相關產(chǎn)品：MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關產(chǎn)品：GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞
Raji細胞系相關產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
SW-480細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞
RERF-LCMS細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
VM-CUB1細胞系相關產(chǎn)品：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞
WM451細胞系相關產(chǎn)品：KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
2PK3細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
HCC-827細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
B16/F0細胞系相關產(chǎn)品：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
NCIH1666細胞系相關產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
NCI-H1092細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
LC-1-sq細胞系相關產(chǎn)品：RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
Lieming Xu-2細胞系相關產(chǎn)品：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
SNU387細胞系相關產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
DHBE細胞系相關產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
C8D1A細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關產(chǎn)品：SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
KHYG細胞系相關產(chǎn)品：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
Hela-mock細胞系相關產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
RPMI 8226細胞系相關產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
PLA-802細胞系相關產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
WSU-DLCL2細胞系相關產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
HLF-a細胞系相關產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
RAMSCs細胞系相關產(chǎn)品：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
HCC0827細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關產(chǎn)品：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
VP267細胞系相關產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
TM3細胞系相關產(chǎn)品：HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
FRTL-5 Adherent大鼠甲狀腺細胞系
SVGp12細胞系相關產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
OCIAML5細胞系相關產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
OSA細胞系相關產(chǎn)品：SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
Fox/NY細胞系相關產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
OV2008細胞系相關產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
Hs688(A)T細胞系相關產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
OC-3-VGH細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
BHT-101細胞系相關產(chǎn)品：MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
SF 767細胞系相關產(chǎn)品：TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
P3HR1細胞系相關產(chǎn)品：SNU119細胞、L-5178-Y細胞、PANC 203細胞
AR42J細胞系相關產(chǎn)品：COR-L88細胞、HeLa S 3細胞、MDA MB 453細胞
GM12878細胞系相關產(chǎn)品：KM-12細胞、MHCC 97-H細胞、GM3190細胞
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