"hCMEC/D3 Adherent永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料：腦微血管；內(nèi)皮細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
hCMEC/D3 Adherent永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
KMS-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞
Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
細胞生長特性：貼壁
hCMEC/D3 Adherent永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
SK-MEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
NS-I/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
hCMEC/D3 Adherent永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞系
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞
Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞
HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞
YD-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
TE3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
PLA 802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
Panc813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
TK-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
SVGp12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
LED-WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞
Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
hCMEC/D3 Adherent永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞系
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
KBM-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
SuDHL 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
EHEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
COLO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
MUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
THP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR420細胞、HT 29細胞、RBMEC細胞
SKNSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 432細胞、MG63細胞、COLO 684細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、IPLB-Sf21AE細胞、HCC0366細胞
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